善恩康专利菌株|瑞士乳杆菌：抗击幽门螺旋杆菌的新力量

幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori，H.pylori）是一种细菌感染，由于H.pylori定植生长在胃内，长期的接触胃粘膜细胞，其分泌的毒素对胃上皮细胞影响严重，在其感染的胃黏膜中可见细胞变性、坏死和炎细胞浸润，血清中可检测到特异性抗体。在感染的直接作用和细胞凋亡的双重影响下，胃腺体易萎缩，并可进一步发展为肠上皮化生和不典型增生，许多研究证实H.pylori是引起慢性胃炎、消化性溃疡的主要致病因素，也是胃癌和胃粘膜相关淋巴组织淋巴瘤的主要诱发因子。

目前针对H.pylori感染通常使用抗生素治疗，随之带来的是H.pylori耐药性，已经成为治疗H.pylori感染全球面临的难题。胃同肠道一样，也定植着大量的菌群，这些菌群在维持胃的正常功能方面也发挥着重要作用。当发生H.pylori感染时，抗生素治疗法除了对H.pylori的清除起到作用，同时也将杀死其它有益菌群，导致胃内的菌群也发生了失调。因此通过益生菌来清除H.pylori的感染，是缓解H.pylori抗生素治疗所致的负面问题的新思路。

菌株功能研究

1.瑞士乳杆菌TM4对H.pylori的抑菌能力

通过观察培养皿中菌的生长情况，并对H.pylori抑菌圈直径进行测量（结果如表1），经刻度尺测量，瑞士乳杆菌TM4对H.pylori的抑菌圈直径为（16.86±1.25）mm，阳性对照菌株嗜酸乳杆菌LA-10A抑菌圈直径为（16.35±0.66）mm，表明瑞士乳杆菌TM4对H.pylori具有抑制作用。

表1

2.瑞士乳杆菌TM4体外抑制H.pylori尿素酶活性比较

将1×10⁹ CFU/mL（OD₆₀₀≈1）的瑞士乳杆菌TM4、嗜酸乳杆菌LA-10A与H.pylori菌液按照1:4体积比共培养后，GDH（U/10⁴ cell）检测结果表示，Hp-TM4组尿素酶检测水平为0.33±0.04，与BHI组相比，H.pylori的尿素酶活性出现了降低的趋势且优于Hp-BASL组，如表2。

表2

3.结晶紫染色法检测生物膜的抑制效果

如表3所示，通过结晶紫染色测定瑞士乳杆菌TM4对生物膜总量生长的作用，在72 h，BASL阳性对照菌株，抑制率为74.4%；TM4处理组，抑制率达到75.94%，说明瑞士乳杆菌TM4具有较强的抑制生物膜形成作用。

表3

4.瑞士乳杆菌TM4抑制H.pylori对GES细胞膜损伤作用

如图1所示，H.pylori感染GES细胞6h后，BHI组细胞出现拉长、变形，空泡化以及大量的蜂鸟样改变。而添加瑞士乳杆菌TM4干预后，橘色荧光强度降低，细胞形态的改变有所缓解，说明瑞士乳杆菌TM4能够抑制H.pylori所导致的细胞膜损伤。

图1

5.瑞士乳杆菌TM4抑制H.pylori对GES细胞活性影响

如图2所示，通过Calcein-AM/PI活死细胞荧光双染染色结果发现，在共培养孵育6h后，与NC组相比，H.pylori的诱导下，BHI组致细胞死亡率增高，红色荧光标注显著；添加瑞士乳杆菌TM4干预后，可显著降低细胞的死亡率，红色荧光强度较BHI和Hp-BASL减弱效果明显，说明瑞士乳杆菌TM4能够抑制H.pylori所导致的细胞死亡。